پایان نامه بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش
چکیده پایان نامه
اطلاع از مسیرهای متابولیسم دارو نقش مهمی در درک سمیت دارو دارد. این اطلاعات می توانند در طراحی داروهای جدید و روشن کردن مکانیسم سرطان زایی ترکیبات شیمیایی به کار روند. از
این رو یافتن روشی مناسب برای بررسی متابولیسم داروها گام مهمی در جهت رسیدن به دیگر اطلاعات با ارزش در مورد داروها است. متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان، خرگوش و موش صحرایی بررسی شده است. طبق نتایج به دست آمده از این مطالعات نوسکاپین از دو مسیر o- دمتیلاسیون و شکسته شدن پیوند C1-9 متابولیزه می شود و مکونین به عنوان محصول عمده متابولیسم آن شناخته شده است. در این تحقیق متابولیسم نوسکاپین توسط یک روش ex vivo، سلولهای جدا شده کبدی، مورد بررسی قرار گرفت این روش از چند جنبه دارای اهمیت است: این روش حد واسط مناسبی بین روشهای قبلی مانند آنزیم های حل شده، فراکسیون ارگان جدا شده و مطالعه مستقیم روی حیوان کامل است. این سلولها خصوصیات لازم بافت دست نخورده مانند نفوذپذیری غشا را دارا هستند از این رو در بسیاری از مطالعات بیوشیمیایی به کار می روند.
در این تحقیق سلولهای کبد موش صحرایی طی یک فرآیند دقیق جدا شدند و زنده بودن آنها با آزمایش منع تریپان آبی %1/0 و مشاهده میکروسکوپی سلولها تأیید شد. شناسایی استاندارد داروی نوسکاپین و متابولیت اصلی آن، مکونین توسط روش HPLC صورت گرفت. اگر چه استانداردهای نوسکاپین و متابولیت اصلی آن در محلولهای Spike شده مشاهده شدند اما این روش قادر به شناسایی متابولیت ها در عصاره سلولی نبود. به نظر می رسد که افزایش حساسیت روش به مشاهده همزمان نوسکاپین و متابولیت ها کمک کند.
تعداد صفحات 77 word
فهرست مطالب
چکیده پایان نامه
بخش اول: مقدمه
مقدمه......................................................................................................................
1-1- اوپیوییدها.......................................................................................................
1-1-1- تاریخچه.....................................................................................................
1-1-2- آلکالوییدهای تریاک.....................................................................................
1-1-3- پپتیدهای اوپیویید درون زاد..........................................................................
1-1-4- آثار اوپیوییدها بر اعضای مختلف..................................................................
1-1-5- مصارف بالینی اوپیوییدها..............................................................................
1-2- متابولیسم........................................................................................................
1-2-1- تاریخچه.....................................................................................................
1-2-2- کلیات متابولیسم..........................................................................................
1-2-3- مکان های متابولیسم داروها..........................................................................
1-2-4- عوامل تعیین کننده سرعت تغییر شکل زیستی.................................................
1-2-5- تکنیک های تجربی بررسی متابولیسم............................................................
1-2-6- کاربرد و اهمیت بررسی متابولیسم.................................................................
1-3- جداسازی سلولهای کبد....................................................................................
1-4- روش های مطالعه شده برای شناسایی و اندازه گیری نوسکاپین و متابولیت هایش..
1-5- کلیاتی درباره کروماتوگرافی و HPLC..............................................................
1-5-1- تاریخچه.....................................................................................................
1-5-2- اساس کروماتوگرافی....................................................................................
1-5-3- فازهای متحرک و ساکن در کروماتوگرافی مایع..............................................
1-5-4- کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا..................................................................
1-5-5- اساس دستگاه HPLC..................................................................................
1-6- نوسکاپین........................................................................................................
1-6-1- برخی اثرات نوسکاپین.................................................................................
1-6-2- فارماکوکینتیک نوسکاپین..............................................................................
1-6-3- مروری بر روند متابولیسم نوسکاپین..............................................................
بخش دوم: روشها و مواد
2-1- اهداف مطالعه..................................................................................................
2-2- دستگاه ها و وسایل ........................................................................................
2-3- مواد...............................................................................................................
2-4- تهیه بافرهای پرفیوژن.......................................................................................
2-4-1- محلول Stock بافر هنکس با غلظت 10 برابر.................................................
2-4-2- محلول Stock بافر کربس- هنزلیت با غلظت 2 برابر......................................
2-4-3- بافر هنکس یک...........................................................................................
2-4-4- بافر هنکس دو............................................................................................
2-4-5- بافر کربس آلبومین......................................................................................
2-4-6- بافر کربس- هپس.......................................................................................
2-5- تهیه محلول کلاژن و کوت کردن پلیت 6خانه.....................................................
2-6- محیط کشت...................................................................................................
2-6-1- مراحل تهیه محیط کشت: (1:1) DMEM, F12................................................
2-7- سرم جنین گاو (FBS).....................................................................................
2-8- کیت استریل پرفیوژن.......................................................................................
2-9- تهیه هپاتوسیت های تازه..................................................................................
2-9-1- نگهداری سلولهای به دست آمده از کبد موش................................................
2-9-2- بررسی حیات سلولی و نحوه اثر دادن دارو روی سلولهای جدا شده از کبد موش............
2-9-3- تهیه نمونه برای انجام آنالیز...........................................................................
2-10- روش سنتز مکونین (6 و 7- دی متوکسی فتالید)..............................................
2-11- دلایل انتخاب HPLC....................................................................................
2-11-1- مشخصات دستگاه HPLC.........................................................................
2-11-2- انواع روش های HPLC آزمایش شده.........................................................
2-11-3- روش تهیه بافر 10X استات با 4 pH=........................................................
2-11-4- روش تهیه بافر فسفات سدیم Mm 25 با 5/4 pH=......................................
2-12- استخراج متابولیت از ادرار انسان.....................................................................
بخش سوم: نتایج
3-1- جداسازی سلولهای کبد....................................................................................
3-2- سنتز مکونین...................................................................................................
3-3- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)....................................................
بخش چهارم: بحث و نتیجه گیری
4-1- جداسازی سلول های کبد موش........................................................................
4-2- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)....................................................
4-3- متابولیسم نوسکاپین.........................................................................................
4-4- متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان....................................................................
خلاصه انگلیسی.......................................................................................................
منابع........................................................................................................................
اختصارات...............................................................................................................
مقاله بدن سالم با تغذیه سالم
هر کس که کار پرورش و آماده سازی بدن و یا شرکت برای کسب مهارت های ورزشی را آغاز می کند، باید آگاهی هایی درباره غذا و نیز شیوه تولید کالری در بدن خویش داشته باشد . به طور کلی نقش تغذیه در بسیاری ور زش ها قابل توجه است . به عنوان مثال 40 درصد دستاوردهای مهارت های ورزشی نتیجه تغذیه درست و مناسب است.اهمیت ارتباط تغذیه با ورزش فقط مربوط به ورزشکاران حرفه ای نیست و هرکسی در هر سطحی که به ورزش می پردازد، باید اصول تغذیه را رعایت کند.تغذیه ورزشکاران و افر اد عادی خیلی با هم تفاوت ندارد ولی تغذیه عامل مهمیاست که در کنار سلامت جسمی و روحی و آمادگی بدنی در موفقیت ورزشکار نقشتعیین کننده ای دارد.در حقیقت اصول تغذیه یکسان است، ولی به دلیل فعالیت بدنی بیشتر، نیاز یک ورزشکار به مواد غذایی بیشتر از افراد عادی است.برای تشخیص مقدار کالری مورد نیاز و در نتیجه رژیم غذایی مناسب عوامل مختلف نظیر سن، جنس، قد، وزن، توده عضلانی بدن، شرایط فیزیولوژیک و نیز نوع ورزش از لحاظ قدرتی یا استقامتی بودن موثر است.٢- انرژی مورد نیاز یک ورزشکار باید 50 درصد از کربوهیدرات های پیچیده، 3010 درصد از پروتین و 10 درصد از قندهای ساده تامین - 20 درصد از چربی، 15می شود.علم تغذیه ورزشی، به بررسی مواد غذایی و رابطه آن با ورزش می پردازد . دراینجا قصد نداریم به بررسی علمی و پیچیده مباحث این علم بپردازیم، زیرا این مبحث بسیار وسیع بوده و با علوم دیگر ی مانند فیزیولوژی، مورفولوژی، ژنتیک و بیوشیمی وغیره نیز در ارتباط تنگاتنگ است و قرار نیست این مباحث در این چکیده بررسیگردد، بلکه لازم است به مباحثی مثل هضم، جذب و متابولیسم پرداخته شود.باید توجه داشت غذایی که می خوریم مستقیما در انجام وظایف و اعمال بدنشرکت ندارند و باید تحت تغییرات شیمیایی و فیزیکی قرار گیرند تا به مواد قابلاستفاده بدن تبدیل شوند و به کل این تغییرات هضم غذا گفته می شود.ورود مواد هضم شده از دیواره لوله گوارش به داخل خون را جذب غذا گفته می شود. هضم و جذب غذا توسط دستگاه گوارش صورت می گیرد.متابولیسم: به کلیه واکنش های شیمیایی درون بدن موجودات زنده از جمله انسان متابولیسم گفته می شود و شامل ساخته شدن مواد (آنابولیسم ) و تجزیه موادقبلی (کاتابولیسم) است.
