بررسی میزان شیوع کریپتوسپوریدیوم انسانی در شهر ارومیه و تعیین گونه های انگل با استفاده از آنالیز PCR

کریپتوسپوریدیوم یک پروتوزوئر زئونوز است که به عنوان عامل مهم اسهال آندمیک و اپیدمیک شناخته شده که اغلب
کودکان و بیماران دچار نقص سیستم ایمنی بویژه مصرف کننده داروهای سرکوبگر ایمنی سلولار و هومورال را تهدید
میکند. مطالعه حاضر با هدف بررسی میزان شیوع کریپتوسپوریدیوم و ارتباط آن با برخی از متغیرها و تمایز ایزوله
های انسانی بر مبنای قطعه 597bp ژن 85s rRNA ، جهت تعیین گونه های شایع این انگل در ارومیه طراحی و اجرا شد. در
8011 نمونه مدفوع از آزمایشگاههای ارومیه مورد بررسی قرار گرفت. پس - - ، این مطالعه توصیفی مقطعی، طی تیر 49 خرداد 49
ازتغلیظ با روش فرمالین اتیل استات، در ادامه گسترشهای تهیه شده بروش کاینیون اسید فاست رنگ آمیزی شد، جهت -
بررسی مولکولی نمونه های مثبت بروشهای گرادیانت منقطع ساکارز و گرادیانت پرکول مورد تخلیص و جداسازی قرار گرفتند
در مرحله بعد DNA ژنومی استخراج و قطعه ژن 85s rRNA جدایه ها با روش Nested-PCR تکثیر گردید، سپس
محصول PCR با آنزیم محدود کننده Vsp8 برش داده و تعیین ترداف شد. پردازش اطلاعات با بهره گیری از نرم
افزار Excell,v.0189 و v., 84 SPSS انجام پذیرفت. برای تعیین ارتباط بین متغیرها از آزمون )کای اسکوئر χ0 ( با
1٪( مثبت / اطمینان 47 ٪ استفاده شد.از نمونه های رنگ آمیزی شده بروش کاینیون اسید فاست 88 نمونه ) 40
تشخیص داده شد، آنالیز داده ها نشان داد که اختلاف معنی داری مابین میزان شیوع انگل در گروههای سنی مختلف، محل
سکونت، فصل/ماه ابتلا و ابتلا به نقص سیستم ایمنی با افراد عادی وجود داشت) P<1,18 ( ولی در مورد گروههای جنسی
تفاوت معنی داری در میزان شیوع وجود نداشت ) P>1,18 (. همه نمونه های مثبت با روش Nested-PCR تأیید شد. نتایج
PCR-RFLP روی ژن 85s rRNA نشان داد که از میان 88 ایزوله مثبت انسانی ، 4 ایزوله دارای ژنوتایپ
کریپتوسپوریدیوم پاروم و 0 ایزوله دیگر ژنوتایپ هومنیس بود که بیانگر غالبیت مطلق کریپتوسپوریدیوم پاروم حیوانی در
آلودگیهای انسانی بود.